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分子雜交箱的工作原理

作者:    來源:    發(fā)布時(shí)間:2019/6/10 8:37:27    瀏覽量:

   是采用核酸分子雜交技術(shù)檢測(cè)待測(cè)基因組中是否含有已知基因序列的設(shè)備,分子雜交箱廣泛地使用于克隆基因的篩選、酶切圖譜的制作、基因組中特定基因序列的檢測(cè)和遺傳病的基因診斷等方面。

   分子雜交箱可調(diào)節(jié)支腳保證的平衡;溫度范圍:高于室溫10°C-100°C ;獨(dú)特的雙面玻璃門;無聲安全,提供長(zhǎng)久保護(hù);大容量,可以容納多達(dá)24個(gè)小試管或6個(gè)獨(dú)特的大試管。

    核酸分子雜交技術(shù)根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則,在一定條件下用標(biāo)記的已知DNA或RNA片段(探針)來檢測(cè)樣本中是否有待測(cè)的核酸序列 [1]  。

    生理?xiàng)l件下DNA呈穩(wěn)定的雙鏈螺旋結(jié)構(gòu),在體外,當(dāng)有變性因素存在時(shí)(如溫度超過65℃、含胺或極端pH時(shí)),DNA分子內(nèi)部的氫鍵斷裂,解離成兩條單鏈DNA,這種現(xiàn)象稱為變性。在除去變性因素后,單鏈DNA能通過堿基互補(bǔ)再結(jié)合成穩(wěn)定的雙鏈螺旋結(jié)構(gòu),此過程稱為復(fù)性或退火。

    在復(fù)性過程中,若存有與樣本核酸某部分序列相同或高度同源的外源性單鏈DNA片段或寡核苷酸(一般為17~45個(gè)堿基)時(shí),兩者可通過互補(bǔ)堿基形成雜交體,即雙鏈DNA分子,這一過程稱為雜交。用一段已知的DNA片段加入復(fù)性的DNA中分子雜交箱,若能夠結(jié)合成雙鏈分子,說明樣本中含有已知的DNA序列。

    核酸分子雜交不僅發(fā)生在DNA與DNA之間,也可發(fā)生在RNA與RNA、RNA與DNA之間。生成的雜交體分別為 DNA-DNA、 RNA-RNA或 RNA-DNA的雙鏈結(jié)構(gòu)。


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